实验室发酵罐是微生物培养、发酵实验的核心设备，精准规范的基础操作不仅能保障实验数据的准确性，还能延长设备使用寿命，避免因操作不当引发的污染、发酵失败等问题。以下为实验室发酵罐从开机准备到停机收尾的全套基础操作要点，适配常规小型实验室发酵罐的日常使用。
 

　　一、操作前准备：排查 + 灭菌，从源头规避问题
 

　　设备外观与配件排查：检查发酵罐罐体、管路、密封件(密封圈、垫片)是否完好，无破损、裂纹、老化；确认搅拌桨、通气管道、取样口、补料口等配件安装到位，连接紧密；检查电源、温控、搅拌、通气等控制系统显示正常，无报警提示。
 

　　培养基与物料准备：按实验配方配置培养基，经充分溶解、定容后，通过罐体加料口加入罐内，加液量控制在罐体有效容积的60%-80%，避免发酵过程中泡沫溢出或搅拌不充分。
 

　　罐体密闭与灭菌操作：关闭所有阀门(取样、补料、排气除外)，确保罐体完全密闭；采用高温高压灭菌方式(常规 121℃，0.1MPa，20-30min)，灭菌过程中保持排气阀微开，排出罐内冷空气，保证灭菌效果；灭菌完成后，待罐体自然降温至实验所需温度，关闭排气阀，准备后续操作。
 

　　无菌环境确认：操作区域提前用酒精擦拭或紫外灯灭菌，实验人员穿戴无菌手套、口罩，避免人为污染。
 

　　二、开机运行：参数设置 + 精准调控，保障发酵条件稳定
 

　　基础参数设定：根据发酵菌株的生长特性，依次设置温度、搅拌转速、通气量核心参数：温度控制精度一般为 ±0.5℃，搅拌转速从低到高逐步调节(常规实验室罐 50-500r/min)，通气量以溶氧满足菌株需求为标准(通常以体积溶氧率 DO 表示)。
 

　　溶氧与 pH 调控：若实验需实时监控溶氧和 pH，提前校准溶氧电极、pH 电极，将电极插入罐体并固定；溶氧不足时，可通过提高搅拌转速或增加通气量调节；pH 偏离设定值时，通过自动补酸 / 补碱系统或手动少量添加酸碱溶液微调，避免 pH 骤变影响菌株生长。
 

　　泡沫控制：发酵过程中若产生大量泡沫，可通过添加少量无菌消泡剂(如聚醚类、硅油类)控制，添加量按需把控，避免过量抑制菌株活性；也可通过降低搅拌转速、适当减少通气量临时缓解泡沫问题。
 

　　实时观察与记录：运行过程中，定时观察罐体内部发酵状态(菌体生长、泡沫、颜色变化等)，记录温度、pH、溶氧、搅拌转速等参数，确保参数无漂移，发现异常及时调整。
 

　　三、过程操作：取样 + 补料，无菌操作是关键
 

　　无菌取样：取样前，用酒精擦拭取样口，打开取样阀排出少量发酵液(冲洗管路)，再用无菌容器收集样品；取样完成后，关闭取样阀，再次擦拭取样口，保持无菌。
 

　　补料操作：若需中途补加营养物、诱导剂，补料液需提前灭菌，通过无菌补料管路缓慢加入罐内，避免因补料速度过快导致发酵体系环境突变；补料后及时记录补料量、补料时间。
 

　　四、停机收尾：放料 + 清洁 + 保养，做好设备后续维护
 

　　发酵终止与放料：达到发酵周期后，关闭搅拌、通气、温控系统，打开放料阀，将发酵液通过无菌管路转移至收集容器；放料完成后，关闭所有阀门。
 

　　罐体清洁：拆除电极、搅拌桨等可拆卸配件，用清水冲洗罐体内壁及管路，去除残留发酵液；若有顽固污垢，用软毛刷轻轻刷洗，避免划伤罐体；配件单独清洗，晾干备用。
 

　　设备保养：清洁完成后，检查密封件是否有磨损，及时更换老化配件；对搅拌轴承、电机等运动部件添加少量润滑油；将电极浸泡在保护液中(pH 电极泡饱和 KCl 溶液，溶氧电极泡清水)，做好电极保护。
 

　　环境整理：清理操作台面，擦拭设备外观，保持实验室整洁；记录本次发酵的设备运行情况、操作要点及异常问题，便于后续追溯。
 

　　五、基础操作核心注意事项
 

　　全程严格遵循无菌操作规范，任何环节的污染都会直接导致发酵实验失败；
 

　　实验室发酵罐运行时，禁止触碰搅拌桨等运动部件，避免机械伤害；高温灭菌后，禁止直接接触罐体，防止烫伤；
 

　　严禁超容积装液、超转速运行，避免设备过载损坏；
 

　　若操作中出现设备报警、罐体泄漏、温度骤变等异常，立即停机，排查问题并解决后，方可继续使用。